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Tipo do documento: Dissertação
Título: Influência de diferentes sistemas nutricionais na pré e peripuberdade de borregas sobre a abundância relativa de RNAm DE IGF1/IGFBP3 enzimas esteroidogênicas e receptor de leptina em corpo lúteo
Título(s) alternativo(s): Molecular investigation of the corpus luteum from ’sheep sheep submitted to different nutritional plans in the peripuberty
Autor: Santos, Helena Cristina Ribeiro Koharata 
Primeiro orientador: Silvestre, Caliê Castilho
Primeiro membro da banca: Grecco, Fabíola Cristine de Almeida Rego
Segundo membro da banca: Ruediger, Felipe Rydygier de
Resumo: O objetivo do presente projeto foi investigar a influência de 3 diferentes sistemas nutricionais na pré e peripuberdade de borregas sobre a expressão gênica do fator de crescimento semelhante a insulina 1 (IGF-1), da proteína ligadora de IGF3 (IGFBP3), da proteína reguladora aguda da esteroidogênese (STAR), da 3β-hidroxiesteroide desidrogenase (HSD3B) e do receptor de leptina (LEPR) em corpos lúteos (CLs) de diestro. O status nutricional é o principal fator que influencia a habilidade do animal para se reproduzir. O início da puberdade e a manutenção da função reprodutiva estão fisiologicamente ligados à nutrição e a condição corporal. Variações nutricionais influenciam o metabolismo, com consequente reflexo nas concentrações de hormônios e seus receptores. Para a obtenção dos CLs, foram utilizadas 24 borregas (7/8 Dorper), com idades entre 6 e 7 meses. As borregas foram aleatoriamente distribuídas em 1 de 3 grupos alimentares. G-Sub (70%-80% da exigência do National Research Council [NRC]); G-Control (100-110% [NRC] e G-Super (140% [NRC]). As borregas do G-Sub (n=8) e G-Control (n=8) foram mantidas em pastagem de Panicum maximum cv.Tanzânia com acesso a água e sal mineral ad libitum e apenas as do grupo G-Super receberam 1,5% do peso vivo de ração comercial duas vezes ao dia. As borregas do G-Super (n=8) ficaram confinadas durante todo o período experimental, recebendo dieta total, na proporção volumoso concentrado de 20:80, contendo 16% de PB e 72% de NDT, visando ganho de peso diário de 200g/dia conforme NRC, sendo o acesso à água e sal mineral ad libitum. Inicialmente as ovelhas receberam 3,5% do peso vivo da dieta total (feno+ração), sendo esta porcentagem aumentada até atingir em média de 4,5 a 5% do peso vivo. Quando atingiram o peso corporal de 35kg as borregas sincronizadas pela inserção de um dispositivo vaginal de liberação lenta de progesterona (CIDR®) por 12 dias. No dia da retirada do implante (D12) administrou-se, por via intramuscular, 0,075mg de cloprostenol e 300UI de gonadotrofina coriônica equina e oito dias após as ovelhas foram abatidas e o aparelho reprodutor removido para pesagem e processamento das amostras de CLs para posterior análise da expressão gênica. Fragmentos dos CLs que foram depositados em nitrogênio líquido (-196oC) e armazenados em freezer de -80oC foram utilizados para realização da RT-qPCR. Esses fragmentos (aproximadamente 40mg) submetidos ao protocolo de extração do Trizol® (ThermoFisherScientific®) de extração total. A transcrição reversa foi realizada utilizando o protocolo da Superscript® III (Invitrogen TM, Termo Fisher Scientific, Brasil), seguindo protocolo do fabricante. A qPCR foi realizada para a análise quantitativa da expressão gênica relativa. A partir da análise estatística, notou-se que houve efeito do manejo nutricional na abundância relativa do receptor de leptina, o qual foi maior nas borregas do grupo G-Super. Já as enzimas HSD3B1 (p= 0,1085) , STAR (p = 0,6516), IGF (p= 0,3277) e IGBP3 (p= 0,12) não diferiram de acordo com o plano nutricional. Concluiu-se que os diferentes planos nutricionais ofertados para as borregas na pré e peripuberdade impactaram no peso corporal e consequentemente na abundância relativa dos receptores de Leptina de forma significativa.
Abstract: The main objective of this study was to investigate the influence of 3 nutritional systems in pre and peripuberty of ewe lambs on the gene of insulin growth factor 1 (IGF1), IGF binding protein 3 (IGFBP3), the acute insulin regulatory protein steroidogenesis (STAR), 3β-hydroxysteroid dehydrogenase (HSD3B) and leptin receptor (LEPR) in diestrus corpus luteum (CLs). Nutritional status is the main factor influencing an animal's ability to protect itself. The onset of puberty and the maintenance of reproductive function are physiologically linked to nutrition and body condition. Modified variations of metabolism, with consequent reflection on consequences and their receptors. To survive the CLs, 24 ewe lambs (7/8 Dorper), aged between 6 and 7 months, were used. As lambs, groups were randomly assigned to 1 of 3 foods. G-Sub (70%-80% of the National Research Council [NRC] requirement); G-Control (100-110% [NRC] and G-Super (140% [NRC]).G-Sub (n=8) and G-Control (n=8) ewes were kept on Panicum maximum cv.Tanzania pasture with access to water and mineral salt and only as from the G-Super group 1.5% twice the weight of commercial live feed (8) were confined throughout the experimental period, receiving the total diet, in the proportion of rough weight concentration of 20:80, containing 16 % of CP and 72% of TDN, aiming at a daily weight gain of 200g/day according to NRC, with access to water and mineral salt ad libitum. average 5% of live weight. When they reached a body weight of 35 kg, the ewes were synchronized by the insertion of a vaginal device for slow release of progesterone (CIDR®) for 12 days. On the day of implant removal (D12), 0.075mg of cloprostenol and 300IU of equine chorionic gonadotropin were administered intramuscularly and eight days later the sheep were slaughtered and the reproductive system removed for weighing and processing of CL samples for later gene expression analysis. Fragments of LCs that were deposited in liquid nitrogen (-196oC) and stored in a freezer at -80oC were used to perform RT-qPCR. These fragments (approximately 40mg) were submitted to the total extraction protocol of Trizol® (ThermoFisherScientific®). Reverse transcription was performed using the Superscript® III protocol (Invitrogen TM, Termo Fisher Scientific, Brazil), following the manufacturer's protocol. qPCR was performed for the quantitative analysis of relative gene expression. From the statistical analysis, it was noted that there was an effect of nutritional management on the relative abundance of the leptin receptor, which was higher in ewes of the G-Super group. The enzymes HSD3B1 (p=0.1085), STAR (p=0.6516), IGF (p=0.3277) and IGBP3 (p=0.12) did not differ according to the nutritional plan. It was concluded that the different nutritional plans offered to ewes in pre and peripuberty had a significant impact on body weight and consequently on the relative abundance of Leptin receptors.
Palavras-chave: ovinos; HSD3b; leptina; IGF; IGFBP3; STAR.
sheep; HSD3B; LEPTIN; IGF; IGFBP3; STAR.
Área(s) do CNPq: CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Universidade do Oeste Paulista
Sigla da instituição: UNOESTE
Departamento: Mestrado em Ciência Animal
Programa: Mestrado em Ciência Animal
Citação: Santos, Helena Cristina Ribeiro Koharata. Influência de diferentes sistemas nutricionais na pré e peripuberdade de borregas sobre a abundância relativa de RNAm DE IGF1/IGFBP3 enzimas esteroidogênicas e receptor de leptina em corpo lúteo. 2022. 74f. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) - Universidade do Oeste Paulista, Presidente Prudente, 2022.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
URI: http://bdtd.unoeste.br:8080/jspui/handle/jspui/1533
Data de defesa: 27-Jun-2022
Aparece nas coleções:Mestrado em Ciência Animal

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