???item.export.label??? ???item.export.type.endnote??? ???item.export.type.bibtex???

Please use this identifier to cite or link to this item: http://bdtd.unoeste.br:8080/jspui/handle/jspui/1578
Tipo do documento: Dissertação
Título: Caracterização estrutural e farmacológica de peptídeos isolados do veneno de Bothrops bilineatus smaragdinus (Víbora Amazônica) com potencial atividade moduladora da liberação sináptica motora
Título(s) alternativo(s): Structural and pharmacological characterization of peptides isolated from the venom of Bothrops bilineatus smaragdinus (Amazon viper) with potential modulatory activity of motor synaptic release
Autor: Couceiro, Fernanda Yumi Giglio Morimoto 
Primeiro orientador: Floriano, Rafael Stuani
Primeiro membro da banca: Pacagnelli, Francis Lopes
Segundo membro da banca: Zani , Karen de Morais
Resumo: Bothrops bilineatus smaragdinus é uma serpente arborícola da região amazônica cuja toxinologia tem sido pouco estudada. Neste trabalho, propomos purificar e identificar estrutural e farmacologicamente neurotoxinas pré-sinápticas do veneno da B. b. smaragdinus com potencial atividade moduladora da liberação sináptica motora. O veneno bruto foi sujeitado à gel filtração, com a fração de interesse sendo então purificada por RP-HPLC, e as toxinas resultantes analisadas quanto ao seu perfil neurotóxico em preparação nervo frênico-diafragma (NFD) de camundongo in vitro. As toxinas com função excitatória sobre a neurotransmissão motora foram sujeitadas à espectrometria de massas para determinação da massa intacta. A gel filtração revelou a existência de oito frações (Picos: P1–P8), sendo que a fração P8 apresentou potente efeito facilitador neuromuscular concentração-dependente, sem exibir atividade fosfolipase A2 (PLA2). Fração P8 (15.6 g/ml) produziu significante aumento na frequência de potenciais de placa terminal em miniatura (PsPTM). Em adição, fração P8 (15.6 g/ml) aumentou significativamente a amplitude de potenciais de placa terminal evocados (PsPT). Análises por RP-HPLC e espectrometria de massas da fração P8 determinaram a presença de dois peptídeos com 652,4849 Da (P8-1) e 531,4108 Da (P8-2) de massa intacta. O peptídeo P8-1 exibiu majoritariamente a ação neuromuscular vista com a fração P8, aumentando a frequência de MEPPs e amplitude of EPPs em preparação NFD de camundongo. Estes achados indicam que o peptídeo P8-1 está primariamente envolvido com o efeito excitatório neuromuscular previamente visto com o veneno de B. b. smaragdinus em preparação NFD de camundongo, provavelmente estimulando a liberação de acetilcolina pelo terminal nervoso motor.
Abstract: Bothrops bilineatus smaragdinus is an arboreal snake from the Amazon region whose toxinology has been negligibly studied. In this work, we proposed to purify and structural and pharmacologically identify presynaptic neurotoxins from B. b. smaragdinus venom with the potential modulating activity of motor synaptic release. The crude venom was subjected to gel filtration, with the fraction of interest then purified by RP-HPLC, and the resulting toxins were analyzed for their neurotoxic profile in a mouse phrenic nerve-diaphragm (PND) preparation in vitro. Toxins with excitatory function on motor neurotransmission were subjected to mass spectrometry to determine intact mass. Gel filtration revealed the existence of eight fractions (Peaks: P1–P8), with fraction P8 showing a potent concentration-dependent neuromuscular facilitating effect, without exhibiting phospholipase A2 (PLA2) activity. Fraction P8 (15.6 g/ml) produced a significant increase in the frequency of miniature endplate potentials (MEPPs). In addition, fraction P8 (15.6 µg/ml) significantly increased the amplitude of evoked endplate potentials (EPPs). Analysis by RP-HPLC and mass spectrometry of the P8 fraction determined the presence of two peptides with 652.4849 Da (P8-1) and 531.4108 Da (P8-2) of intact mass. The P8-1 peptide mostly exhibited the neuromuscular action seen with the P8 fraction, increasing the frequency of MEPPs and amplitude of EPPs in mouse PND preparations. These findings indicate that the P8-1 peptide is primarily involved in the neuromuscular excitatory effect previously seen with B. b. smaragdinus in mouse PND preparation, probably stimulating the release of acetylcholine from the motor nerve terminal.
Palavras-chave: veneno de Bothrops
neurotransmissão motora
facilitação neuromuscular
toxinas pré-sinápticas
Bothrops venom
motor neurotransmission
neuromuscular facilitation
presynaptic toxins
Área(s) do CNPq: CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Universidade do Oeste Paulista
Sigla da instituição: UNOESTE
Departamento: Mestrado em Ciências da Saúde
Programa: Mestrado em Ciências da Saúde
Citação: COUCEIRO, Fernanda Yumi Giglio Morimoto. Caracterização estrutural e farmacológica de peptídeos isolados do veneno de Bothrops bilineatus smaragdinus (Víbora Amazônica) com potencial atividade moduladora da liberação sináptica motora. 2024. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde) - Universidade do Oeste Paulista, Presidente Prudente, SP, 2024.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
URI: http://bdtd.unoeste.br:8080/jspui/handle/jspui/1578
Data de defesa: 14-Mar-2024
Appears in Collections:Mestrado em Ciências da Saúde

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
Fernanda Yumi Giglio Morimoto Couceiro-.pdfDocumento parcial.160,96 kBAdobe PDFThumbnail

Download/Open Preview


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.